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              染色質免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq

              型    號:
              更新時間: 2017-08-03

              染色質免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq
              染色質免疫共沉淀技術主要應用于驗證及探尋體內環境中,蛋白質和DNA的直接相互作用,旨在探索特定蛋白質在DNA上的特定結合序列,常在研究轉錄調控以及組蛋白修飾中被應用到。

              產品介紹:

               

              染色質免疫共沉淀

              服務簡介:

              染色質免疫共沉淀技術主要應用于驗證及探尋體內環境中,蛋白質和DNA的直接相互作用,旨在探索特定蛋白質在DNA上的特定結合序列,常在研究轉錄調控以及組蛋白修飾中被應用到。

              服務原理:

              在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的 DNA 片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質與 DNA 相互作用的信息。

              服務優勢:

              完善的實驗平臺:全進口的儀器試劑,高標準甲醇交聯、Bioruptor超聲打斷;
              2. 專業的實驗流程:*的ChIP優化流程,個性化實驗方案,IP效率高,高成功率(高于95%);
              3. 豐富的實驗經驗:專業的ChIP服務部門,實驗人員從事ChIP實驗長達5年以上,上千次成功ChIP實驗經驗,針對不同動植物組織有不同的前處理方式。
              服務流程:
              1、樣品準備:培養細胞(若樣品為組織,可先培養原代細胞);固定,或者直接活細胞送樣。
              2、細胞固定:此步驟目的為將結合在DNA上的蛋白用共價形式交聯在所結合的位點上,避免在之后的操作步驟中脫離丟失。直接將甲醛加入細胞培養液,搖晃固定10分鐘后,迅速加入2.5M甘氨酸解交聯5分鐘,PBS洗滌,刮下細胞。
              3、超聲打碎: 此步驟目的為將長鏈的DNA打碎成200-1000bp的DNA片段。使用設備是超聲水浴鍋,EP管在冰水混合物中超聲,超聲后細胞懸液變得澄清透明。離心取上清。
              4、免疫沉淀:此步驟是加入特異性抗體和對照IgG,和結合抗體的磁珠(或protein A/G)。經稀釋后,超聲產物分成兩份,分別加入特異性抗體和對照IgG,輪轉過夜,第二天加入磁珠輪轉4小時。
              5、洗滌:此步驟是減少非特異性結合。分別用稀釋緩沖液、低鹽溶液、高鹽溶液、氯化鋰溶液以及TE緩沖液洗滌共7次。用洗脫緩沖液在65℃洗脫過夜。
              6、DNA純化:將洗脫的產物用DNA純化試劑盒純化,得到50ul純化產物,用于檢測ChIP結果。

               

              收費標準/服務周期/提供結果:
              詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

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